कुछ चरण में एक टीएई बफर कैसे बनाएं

टीएई बफर ट्रिस आधार, एसिटिक एसिड और ईडीटीए (ट्राइस-एसीटेट-ईडीटीए) से बना एक समाधान है। यह ऐतिहासिक रूप से पीसीआर प्रवर्धन, डीएनए शुद्धि प्रोटोकॉल या डीएनए क्लोनिंग प्रयोगों से उत्पन्न डीएनए उत्पादों के विश्लेषण में agarose जेल वैद्युतकणसंचलन के लिए इस्तेमाल सबसे आम बफर है।

इस बफर में कम ईओण शक्ति और कम बफरिंग क्षमता है। यह डीएनए के बड़े (> 20 केबी) टुकड़ों के वैद्युतकणसंचलन के लिए सबसे उपयुक्त होता है और उसे लंबे समय तक (> 4 घंटे) जेल रन टाइम के लिए अक्सर या पुनरीक्षित किया जाना चाहिए।

इसे ध्यान में रखते हुए, आप बफर के कई बैचों पर विचार करना चाह सकते हैं।

यह देखते हुए कि बफर बनाने में आसान है और चरणों को जल्दी से किया जा सकता है, एक समय में एक से अधिक बैच बनाने से विशेष रूप से समय लेने वाली या बंद करना मुश्किल नहीं होना चाहिए। नीचे दिए गए निर्देशों का उपयोग करके, टीएई बफर को बनाने के लिए केवल 30 मिनट लग सकते हैं। यहाँ कैसे है:

ईडीटीए के एक स्टॉक समाधान तैयार करें

एक ईडीटीए (एथिलीनैनेडायमिन टेट्रैसिटिक एसिड) समाधान समय से पहले तैयार किया गया है। EDTA पूरी तरह से समाधान में नहीं जायेगा जब तक पीएच को लगभग 8 में समायोजित नहीं किया जाता है। 0. 500 एमिलिलेटर स्टॉक समाधान के लिए 0. 5 एम EDTA का वजन 9 3। EDTA disodium नमक का 5 ग्राम (एफडब्ल्यू = 372। 2 )। 400 मिलीलीटर विआयनीकृत पानी में भंग और सोडियम हाइड्रोक्साइड (NaOH) के साथ पीएच समायोजित करें। 500 मिलीलीटर के अंतिम मात्रा के समाधान के लिए ऊपर उठाएं।

टीएई की एक स्टॉक समाधान को सचेत करें> ट्रा बेस के 242 ग्राम (एफडब्ल्यू = 121. 14) का वजन करके टीएई के एक केंद्रित (50x) स्टॉक समाधान करें और लगभग 750 विआयनीकृत पानी के मिलीलीटर

सावधानी से 57 जोड़ें। हिमनदों एसिड के 1 मिलीलीटर और 0 के 100 मिलीलीटर। 5 एम EDTA (पीएच 8. 0)। उसके बाद, 1 लीटर की अंतिम मात्रा के समाधान को समायोजित करें यह स्टॉक समाधान कमरे के तापमान पर संग्रहीत किया जा सकता है। इस बफर के पीएच को समायोजित नहीं किया गया है और इसके बारे में 8 होना चाहिए। 5.

टीएई के कार्य समाधान तैयार करें

1x टीएई बफर का कार्य समाधान केवल विआयनीकृत पानी में 50x से स्टॉक समाधान को कम कर दिया जाता है।

अंतिम विलेक सांद्रता 40 मिमी हैं ट्रिस एसीटेट और 1 एमएम ईडीटीए अब बर्गर एक agarose जेल चलाने में उपयोग के लिए तैयार है।

आपको बफर के लिए क्या चाहिए

चूंकि टीएई बफर बनाने से केवल एक त्वरित और सरल निर्देशों की आवश्यकता होती है, इसके लिए जरूरी सामग्री की मात्रा अत्यधिक नहीं है। आपको बस EDTA disodium नमक, ट्रिस आधार, और हिमनदों एसिटिक एसिड की आवश्यकता होगी।

बफर को भी पीएच मीटर और अंशांकन मानकों की आवश्यकता होती है, जैसा कि उपयुक्त है आपको 600 मिलीलीटर और 1500 मिलीलीटर बीकर या फ्लास्क और साथ ही स्नातक किए गए सिलेंडर की आवश्यकता होगी। अंत में, आपको विआयनीकृत पानी की ज़रूरत होगी, सलाखों को हल करें, और प्लेटों को हल करें।

रैपिंग अप

आप किसी स्कूल साइट, एक कार्य स्थल या किसी अन्य स्थान पर, जहां आपके घर पर बफर बनाने की योजना बनाते हैं?टीएई बफर के लिए उपरोक्त सभी सामग्रियों को सुनिश्चित करने के लिए शुरू होने से पहले इन्वेंट्री की जांच करें

यदि आपको सामग्रियों के लिए भुगतान नहीं करना पड़ेगा, तो बफर को अपने घर से बाहर निकालने की सिफारिश की जाएगी। आप आसानी से उन सामग्री को ऑर्डर कर सकते हैं जिनकी आपको ऑनलाइन आवश्यकता है या उनके लिए एक विशेष स्टोर पर जाएं।