कैसे फ्रीज-ड्राय एक बैक्टीरियल कल्चर (लैओफिलाइज़ेशन)

रुक-सुखाने, जिसे लाईफिलाइज़ेशन या क्रयोडिसेकेशन कहा जाता है, एक उत्पाद से जल निकालने की प्रक्रिया है जब इसे जमे हुए (और फिर वैक्यूम के नीचे रखा जाता है) जिससे बर्फ एक ठोस से वाष्प को बदल सकता है, एक तरल चरण के माध्यम से जाने के बिना आइस (या अन्य जमे हुए सॉल्वैंट्स) को एक उत्पाद से हटाया जाता है जिससे कि उच्च बनाने की क्रिया की प्रक्रिया होती है और बाध्य पानी के अणुओं को desorption की प्रक्रिया के माध्यम से निकाल दिया जाता है।

लैओफिलाइज़ेशन की मूल बातें

लंबी अवधि के लिए जीवाणु, कवक, खमीर या अन्य सूक्ष्मजीव संगृहीत संचय करने के सर्वोत्तम तरीकों में से एक फ्रीज-सूखने की प्रक्रिया का उपयोग करना है। यह लघु प्रयोगशाला प्रक्रिया किसी भी वाणिज्यिक रूप से उपलब्ध फ्रीज-ड्रायर के साथ की जा सकती है जो आपकी संस्कृति संग्रह को बनाए रखेगी। क्योंकि लैओफिलाइज़ेशन सूखने का सबसे जटिल और महंगी रूप है, क्योंकि प्रक्रिया आमतौर पर उच्च मूल्य के नाजुक, गर्मी-संवेदनशील सामग्री तक सीमित होती है। ठहराव से क्षतिग्रस्त नहीं किए जाने वाले पदार्थों को आम तौर पर लैफिलाइज्ड किया जा सकता है ताकि प्रशीतित भंडारण अनावश्यक हो।

यह प्रक्रिया तीन घंटे तक ले सकती है, और 24 घंटों तक, संस्कृति के विकास के समय सहित नहीं।

लैओफिलाइज़ेशन के चरण-दर-चरण प्रक्रिया

1. सबसे पहले, एलबी या अन्य उचित पोषक तत्व की थाली पर सूक्ष्मजीव के रातोंरात संस्कृति या लॉन हो जाना।

2. आगे, समय से पहले आटोक्लेविंग द्वारा बाँझ कतरन-टोपी शीशियों को तैयार करें, कैप्स (रबड़ स्टपर) के साथ शीर्ष पर ढीले रखा गया ऑटोकलिंग से पहले ट्यूबों के अंदर संस्कृति की पहचान के साथ मुद्रित पेपर लेबल रखें। वैकल्पिक रूप से, बाँझपन के लिए डिज़ाइन किए गए कैप वाले ट्यूबों का उपयोग करें।

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3. प्लेट में 4 एमएल लेओफ़िलाइज़ेशन बफर जोड़ें यदि आवश्यक हो, तो कोशिकाओं को एक बाँझ ग्लास रॉड का उपयोग करके निलंबित किया जा सकता है।

4. संकीर्ण शीशियों को संस्कृति निलंबन के तुरंत स्थानांतरण करें लगभग 1. 5 एमएल प्रति शीशी जोड़ें। रबर की टोपी के साथ मुहर

5. शीशीओं को एक -20 डिग्री सेल्सियस फ्रीजर में रखकर शीशियों के अंदर संस्कृति निलंबन को स्थिर कर दें।

6. संस्कृतियों को जमी जाने के बाद, इसे चालू करके फ्रीज-ड्रायर तैयार करें और उचित तापमान और वैक्यूम की स्थिति स्थिर करने के लिए समय की अनुमति दें। ऐसा निर्माता के निर्देशों के मुताबिक फ्रीज-ड्रायर का उपयोग करने वाले ब्रांड के लिए करें।

7. सावधानीपूर्वक, और अजीब तरह से शीशियों के शीर्ष पर शीशी के ढक्कन को रखें, ताकि फ्रीज-सूखने की प्रक्रिया के दौरान नमी बच सकें, और शीशियों को फ्रीज-ड्रायर चैम्बर में रख सकते हैं। निर्माता के निर्देशों के अनुसार वैक्यूम को कक्ष में लागू करें

8. संस्कृति के समय को पूरी तरह से लैओफ़िलाइज़ करने के लिए अनुमति दें (सूख बाहर)। प्रत्येक नमूने की मात्रा और आपके पास कितने नमूनों के आधार पर यह कुछ घंटों से रात भर ले सकता है।

9. निर्माता के निर्देशों के मुताबिक फ्रीज-ड्रायर चैंबर से नमूनों को निकालें और रबर कैप के साथ तुरंत शीशों को सील करें, फिर क्रैम्प टॉप।

10. कमरे के तापमान पर लैओफिलाइज्ड कल्चर कलेक्शन स्टोर करें

उत्पाद की आवश्यकता होगी

• फ्रीज-ड्रिंक
• पोषक तत्व या अन्य उचित प्लेट (और संस्कृति विकसित करने के लिए इनक्यूबेटर)
• ग्लास रॉड
• लयोफिलाइज़ेशन बफर
• रबड़ स्टापर्स के साथ समेटना शीर्ष शीश (और कैप्स को लागू करने के लिए एक अपराधी)
• फ्रीज़र

_{संदर्भ:
सपा वैज्ञानिक फ्रीज ड्राईिंग के बुनियादी सिद्धांत। // www। spscientific। com / फ्रीज-सुखाने-lyophilization-मूल बातें /}