फॉस्फेट बुफ्फ़ेड सलाईन (पीबीएस) < पीबीएस के लिए आम तौर पर इस्तेमाल किया जाने वाला बफर बनाने के लिए फॉस्फेट बुफ़र बनाने के लिए कैसे करें IHC

पीबीएस (फॉस्फेट बफ़ेड खारा) इम्यूनोहिस्टोकेमिक धुंधला के लिए आमतौर पर इस्तेमाल किया बफर है और आमतौर पर जैविक अनुसंधान में उपयोग किया जाता है समाधान के ओएसएमएलआरटी और आयन सांद्रता मानव शरीर (आइसोटोनिक) से मेल खाते हैं।

पीबीएस एक पानी आधारित नमक समाधान है जिसमें सोडियम हाइड्रोजन फॉस्फेट, सोडियम क्लोराइड और कुछ मामलों में, पोटेशियम क्लोराइड और पोटेशियम डाइहाइड्रोजन फॉस्फेट शामिल हैं।

आईएचसी के लिए इम्यूनोफ्लोरोसेन्ट स्टीनिंग

इम्यूनोफ्लोरोसेंट धुंधला पहला इम्युनोहिस्टोकेमिकल (आईएचसी) धुंधला विधि था I प्रतिजन-एंटीबॉडी बाध्यकारी प्रतिक्रिया की मूलभूतता के साथ, एंटीबॉडी प्रतिदीप्ति के साथ संयुग्मित जब प्रतिदीप्ति रंगों का उपयोग करते हुए दृश्यमान हो जाते हैं। प्रक्रिया तब होती है जब एक फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप के तहत विशिष्ट तरंगदैर्ध्य के रोमांचक प्रकाश द्वारा सक्रिय किया जाता है। Immunohistochemistry जैविक ऊतकों में प्रतिजनों के लिए विशेष रूप से बाध्य एंटीबॉडी के सिद्धांत का उपयोग करके एक ऊतक खंड के कोशिकाओं में प्रतिजन (ई।, प्रोटीन) का पता लगाने की प्रक्रिया को संदर्भित करता है।

फॉस्फेट बुफोर्ड सलाइन (पीबीएस) का उपयोग

फॉस्फेट बफ़ेड खारा में कई उपयोग हैं क्योंकि यह अधिकांश कोशिकाओं के लिए आइसोटोनिक और गैर विषैले है यह पदार्थों को पतला करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है और कोशिकाओं युक्त कंटेनरों को कुल्ला करने के लिए उपयोग किया जाता है। सूक्ष्म बायोमोलेक्लस सूखे के तरीकों में पीबीएस का उपयोग किया जा सकता है क्योंकि पानी के अणुओं को पदार्थ के आसपास संरक्षित किया जाएगा (प्रोटीन, उदाहरण के लिए) 'सूखे' होना और एक ठोस सतह पर स्थिर हो जाएगा।

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पदार्थ की पानी की पतली फिल्म, विकृति या अन्य गठनात्मक परिवर्तनों को रोकती है। कार्बोनेट बफ़र्स का उपयोग उसी उद्देश्य के लिए किया जा सकता है लेकिन कम प्रभावशीलता के साथ। पीबीएस का उपयोग एक संदर्भ स्पेक्ट्रम लेने के लिए भी किया जा सकता है जब एल्िप्समिति में प्रोटीन सोखना को मापते हैं।

पीबीएस की तैयारी

पीबीएस तैयार करने के कई अलग-अलग तरीके हैं।

कुछ सूत्रों में पोटेशियम शामिल नहीं है, जबकि अन्य में कैल्शियम या मैग्नीशियम होते हैं। नीचे बफर नुस्खा, जो अपेक्षाकृत आसान है, 10 एक्स पीबीएस स्टॉक समाधान (0. 1 एम) के लिए है। ट्बिइन जोड़ने का एक विकल्प भी प्रदान किया गया है। पूरी प्रक्रिया लगभग 10 मिनट लगती है।

फॉस्फेट बुफ़र सल्न (पीबीएस) कैसे करें इसे लें: 10. 9 जी निर्जल सोडियम फॉस्फेट डिबासिक (Na2HPO4), 3. 2 जी निर्जल सोडियम फॉस्फेट मोनोबासिक (एनएएच 2 पीओ 4), और 90 ग्राम सोडियम क्लोराइड (NaCl)।

1. उपरोक्त सभी को 1 एल डिस्टिल्ड वॉटर के ठीक नीचे भंग कर दें।
2. पीएच को 7 में समायोजित करें। 4. 1 एल के अंतिम मात्रा के समाधान का समाधान करें
3. (वैकल्पिक) 0 से युक्त समाधान के लिए। 5% बीच 20, 5 एमएल के बीच 20 से 1 एल समाधान तक जोड़ें।
4. यदि आवश्यक हो तो pH का उपयोग करने और पुनः समायोजित करने से पहले 10 एक्स पतला
5. पीबीएस बफर बनाने के लिए टिप्स
6. कमरे के तापमान पर स्टोर करें

गैर निर्जल अभिकर्मकों को प्रतिस्थापित किया जा सकता है लेकिन आपको अतिरिक्त पानी के अणुओं को समायोजित करने के लिए प्रत्येक के उचित द्रव्य की पुन: गणना करना होगा।

• आपको पीबीएस बफर बनाने की ज़रूरत है
• सोडियम फॉस्फेट मोनोबासिक (निर्जल)

सोडियम फॉस्फेट डिबासिक (निर्जल)

• सोडियम क्लोराइड
• स्केल और नौकाओं का वजन
• चुंबकीय उत्तेजक और हलचल बार पीएच जांच, कैलिब्रेटेड, और पीएच
• 1 एल वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क समायोजित करने के लिए उचित समाधान
• बीच 20 (वैकल्पिक)