सभी प्रतिबंध एंजाइम के बारे में

प्रतिबंध एंजाइमों के बारे में आप कितना जानते हैं? इस समीक्षा के साथ, वे क्या करते हैं और वे महत्वपूर्ण क्यों हैं, इसकी बेहतर समझ प्राप्त करें

प्रतिबंध एंजाइमों को परिभाषित करना

प्रतिबंध एंडोन्यूक्लिज़ एंजाइम का एक वर्ग है जो डीएनए अणुओं को काटता है। प्रत्येक एंजाइम डीएनए किनारा में न्यूक्लियोटाइड के एक अद्वितीय अनुक्रम को पहचानता है। इस तरह की अनुक्रम आम तौर पर लगभग 4 से 6 आधार-जोड़े लंबे होते हैं। यह अनुक्रम पुलिंदामाइक है जिसमें मानार्थ डीएनए किनारा का रिवर्स दिशा में ही अनुक्रम होता है।

दूसरे शब्दों में, डीएनए की दोनों किस्में एक ही स्थान पर काट ली जाती हैं।

ये एंजाइम कहां मिलते हैं

प्रतिबंध एंजाइमों बैक्टीरिया के कई अलग-अलग उपभेदों में पाए जाते हैं जहां उनकी जैविक भूमिका सेल डिफेंस में भाग लेना है। ये एंजाइम "प्रतिबंधित" विदेशी (ई वायरल) डीएनए है जो कोशिका में प्रवेश करती है, इसे नष्ट कर। होस्ट सेल में एक प्रतिबंध-संशोधन प्रणाली है जो अपने संबंधित प्रतिबंध एंजाइम के लिए विशिष्ट साइटों पर अपनी डीएनए को मिथाइलेट करती है, जिससे क्लेविज से इसकी रक्षा की जाती है। 800 से अधिक ज्ञात एंजाइमों की खोज की गई है जो 100 से अधिक विभिन्न न्यूक्लियोटाइड दृश्यों को पहचानते हैं।

बायोटेक्नोलॉजी में प्रयोग करें

प्रतिबंध एंजाइमों का उपयोग जैव प्रौद्योगिकी में किया जाता है ताकि व्यक्तियों (टुकड़ी खंड की लंबाई पॉलीमॉफिज़म - आरएफएलपी) में टुकड़े की लंबाई के अंतर में अध्ययन करने के लिए डीएनए को छोटे किस्में काट दिया जा सके। उनका उपयोग जीन क्लोनिंग के लिए भी किया जाता है।

आरएफएलपी तकनीकों का उपयोग यह निर्धारित करने के लिए किया गया है कि व्यक्तियों या समूहों के जीनोम के कुछ क्षेत्रों में जीन अनुक्रमों और प्रतिबंध दरार पैटर्न में विशिष्ट अंतर है।

इन अनूठे क्षेत्रों का ज्ञान डीएनए फिंगरप्रिंटिंग के लिए आधार है। इन तरीकों में से प्रत्येक डीएनए टुकड़ों को अलग करने के लिए agarose जेल वैद्युतकणसंचलन के उपयोग पर निर्भर करता है। टीबीई बफर, जो ट्राइस बेस, बोरिक एसिड, और ईडीटीए से बना होता है, का उपयोग आम तौर पर डीएनए उत्पादों की जांच के लिए agarose जेल वैद्युतकणसंचलन के लिए किया जाता है।

प्रतिबंध एंजाइमों के प्रकार

प्रतिबंध एंजाइमों के तीन अलग-अलग प्रकार के होते हैं टाइप I डीएनए को यादृच्छिक स्थानों पर मान्यता साइट से 1000 या उससे अधिक बेस-जोड़ी में कट जाता है। साइट से लगभग 25 बेस-जोड़े में टाइप III कटौती। प्रकार I और III को एटीपी की आवश्यकता होती है और कई उप-इकाइयों के साथ बड़े एंजाइम हो सकते हैं। टाइप II एंजाइम्स, जो मुख्य रूप से जैव प्रौद्योगिकी में उपयोग किया जाता है, एटीपी की आवश्यकता के बिना मान्यता प्राप्त अनुक्रम के भीतर डीएनए को कटौती करता है और छोटे और सरल होते हैं।

टाइप II प्रतिबंध एंजाइमों को बैक्टीरिया की प्रजातियों के अनुसार नामित किया गया है, जहां से वे पृथक हैं। उदाहरण के लिए, एंजाइम इकोआरआई को ई से अलग किया गया था कोलाई । अधिकांश जनता ई से परिचित हैं कोलाई भोजन में प्रकोप

प्रकार द्वितीय प्रतिबंध एंजाइम दो अलग-अलग प्रकार के कटौती उत्पन्न कर सकते हैं, इस पर निर्भर करता है कि क्या वे पहचान अनुक्रम के केंद्र में दोनों किस्में काटते हैं या मान्यता क्षेत्र के एक छोर के करीब प्रत्येक कतरा

पूर्व कटौती से "कुंद समाप्त" कोई न्यूक्लियोटाइड ओवरहांग नहीं होगा। उत्तरार्द्ध "चिपचिए" या "संयोजक" समाप्त होता है क्योंकि डीएनए के प्रत्येक परिणामी टुकड़े में एक टुकड़ा होता है जो अन्य टुकड़ों की प्रशंसा करता है। दोनों पुनः संयोजक डीएनए और प्रोटीन बनाने के लिए आणविक आनुवांशिकी में उपयोगी होते हैं।

डीएनए का यह रूप बाहर खड़ा है क्योंकि यह दो या दो से अधिक विभिन्न किस्में जो मूल रूप से एक साथ जुड़े नहीं थे के बंधन (एक साथ बंधन) द्वारा निर्मित है।