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प्रतिबंधित टुकड़ा लंबाई बहुरूपता (आरएफएलपी) आनुवंशिक विश्लेषण की एक आणविक विधि है जो व्यक्तियों को डीएनए के विशिष्ट क्षेत्रों में प्रतिबंध एंजाइम का अनूठा पैटर्न के आधार पर पहचानने की अनुमति देता है।
इसके अलावा आरएफएलपी विश्लेषण के रूप में संदर्भित, तकनीक व्यक्तिगत लोगों के आनुवंशिक कोड में बहुरूपता का लाभ लेती है। हालांकि एक प्रजाति के सभी सदस्य अनिवार्य रूप से एक ही आनुवंशिक श्रृंगार के होते हैं, ये मामूली अंतर व्यक्तियों के बीच, फ़नाटिपि में विविधताएं जैसे उपस्थिति या चयापचय के लिए होता है।
आरएफएलपी: विश्लेषण तकनीक और अनुप्रयोगों
आरएफएलपी विश्लेषण तकनीक में डीएनए के एक विशिष्ट क्षेत्र को ज्ञात परिवर्तनशीलता के साथ, प्रतिबंध एंजाइमों के साथ में शामिल करना, इसके बाद एग्रोस जेल वैद्युतकणसंचलन द्वारा डीएनए टुकड़ों को अलग करना और टुकड़े और रिश्तेदार आकार
एक प्रतिबंध एंजाइम एंजाइम है, एक प्रोटीन अणु, जो प्रतिबंध साइटों पर डीएनए को कम करता है। संक्षेप में, डीएनए नमूना टूट गया है और प्रतिबंध एंजाइमों द्वारा पच जाता है। परिणामस्वरूप टुकड़े उनकी लंबाई के अनुसार अलग किए जाते हैं और प्रत्येक व्यक्ति द्वारा परीक्षण के लिए टुकड़ा आकार के पैटर्न अलग होंगे।
पूर्ण आरएफएलपी प्रक्रिया में जांच लेबलिंग, डीएनए विखंडन, वैद्युतकणसंचलन, ब्लोटिंग, संकरण, धोने और आटोराडियोोग्राफी की आवश्यकता है। पता चला आरएफएलपी एक आटोराडियोोग्राफी में एक्स-रे फिल्म का उपयोग करके देखा गया है, जहां डीएनए के टुकड़े इलैक्ट्रोफोरेसिस द्वारा एक दूसरे से अलग होने के बाद देखे और उनका विश्लेषण किया जा सकता है।
आरएफएलपी विश्लेषण के लिए कुछ आवेदन शामिल हैं:
- डीएनए फिंगरप्रिंटिंग । अपराधों के दृश्यों पर एकत्र किए गए साक्ष्य नमूनों के आधार पर संदिग्धों की पहचान करने के लिए फोरेंसिक वैज्ञानिक आरएफएलपी विश्लेषण का उपयोग कर सकते हैं।
- पितृत्व। आरएफएलपी का उपयोग पितृत्व के निर्धारण में भी किया जाता है या वंश के अनुरेखण के लिए किया जाता है।
- आनुवंशिक विविधता इस तकनीक का उपयोग वन्य जीवन के विकास और प्रवास के अध्ययन में किया जा सकता है, पशु जनसंख्या में प्रजनन पैटर्न का अध्ययन करना और कुछ रोगों का पता लगाने और निदान में।
जीनोम में विविधता के आरएफएलपी का पता लगाने की तकनीक जीनोम मानचित्रण और आनुवांशिक बीमारी के विश्लेषण का एक महत्वपूर्ण उपकरण है।
यदि किसी विशिष्ट क्रोमोसोम में एक विशेष बीमारी जीन की स्थिति की मांग की जा रही है, तो शोधकर्ता इस बीमारी के साथ परिवार के सदस्यों के डीएनए का विश्लेषण करेंगे, फिर आरएफएलपी एलील्स में विरासत के समान पैटर्न की तलाश करें। एक बार एक रोग जीन स्थानीयकृत हो जाता है, अन्य परिवार के सदस्यों पर आरएफएलपी विश्लेषण आयोजित करने से उत्परिवर्ती जीनों का वाहक प्रकट हो सकता है या संपूर्ण रोग जोखिम को संकेत मिलता है।
यह ध्यान रखना ज़रूरी है कि अब आरएफएलपी तकनीक का व्यापक रूप से उपयोग नहीं किया जा रहा है कि फॉरेंसिक विज्ञान और कई अन्य क्षेत्रों में डीएनए विश्लेषण के लिए नए, अधिक मजबूत तकनीकों का उपयोग किया जाता है।
विश्लेषण का नकारात्मक पहलू
दुर्भाग्य से, आरएफएलपी विश्लेषण तकनीक थकाऊ और धीमी है नमूना डीएनए की एक बड़ी मात्रा के अलावा - नमूना को आम तौर पर एक तिमाही के आकार के बारे में होना चाहिए, जो डीएनए नमूनों के लिए अपेक्षाकृत बड़ा है - प्रोब लेबलिंग से धुलाई और आटोराडियोोग्राफी के लिए प्रक्रिया, एक तक ले जा सकते हैं पूरा करने के लिए पूरा महीने
मानव जीनोम प्रोजेक्ट के परिणाम में आरएफएलपी की आवश्यकता को बहुत ज्यादा बदल दिया गया है मानव कोशिकाओं, मानव जीनोम, और मानव जीनोम में सभी जीनों की पहचान करने के लिए डीएनए के पूरे अनुक्रम को निर्धारित करने के लिए इस परियोजना की अनुमति है।
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